Γρήγορη κασέτα δοκιμής EBNA IgG με το δείγμα ολόκληρου του αίματος/του ορού/του πλάσματος

Εφαρμογή:

Η γρήγορη κασέτα δοκιμής EBNA IgG (ολόκληρο αίμα/ορός/πλάσμα) είναι γρήγορο χρωματογραφικό immunoassay για την ποιοτική ανίχνευση των αντισωμάτων IgG σε EBNA του ιού epstein-Barr ανθρώπινο ολόκληρο στο αίμα, τον ορό, ή το πλάσμα.

Περιγραφή:

Epstein-Barr ο ιός το (EBV) είναι ένας πανταχού παρών ανθρώπινος ιός που προκαλεί μολυσματικό mononucleosis το (IM), μια μόνη περιοριστική lymphoproliferative ασθένεια 1. Από την ενηλικίωση ουσιαστικά ο καθένας έχει μολυνθεί με και έχει αναπτύξει την ασυλία στον ιό. Στις υπανάπτυκτες χώρες, seroconversion στον ιό πραγματοποιείται στην πρόωρη παιδική ηλικία και είναι συνήθως ασυμπτωματικά 2. Σε περισσότερες εύπορες χώρες, τις αρχικές μολύνσεις EBV καθυστερούν συχνά μέχρι την εφηβεία ή πιό πρόσφατος, και την προκήρυξη ως IM για 50% αυτής της ηλικιακής ομάδας 3-5. Μετά από seroconversion, είτε συμπτωματικό είτε όχι, EBV καθιερώνει μια χρόνια, λανθάνουσα μόλυνση στα λεμφοκύτταρα Β που διαρκεί πιθανώς για τη ζωή 6. EBV στα oropharyngeal epithelial κύτταρα και είναι παρόν στο σάλιο των περισσότερων ασθενών με IM 7. Επιπλέον, 10-20% των υγιών προσώπων που είναι θετικό αντισωμάτων EBV έριξε τον ιό στις προφορικές εκκρίσεις τους 6-8. Η επανενεργοποίηση του λανθάνοντος προερχόμενου από ιό κράτους φορέων, όπως αποδεικνύεται από τα αυξανόμενα ποσοστά ιού που ρίχνουν, ενισχύεται από την καταστολή του ανοσοποιητικού συστήματος, την εγκυμοσύνη, τον υποσιτισμό, ή την ασθένεια 8,9. Οι χρόνιες μολύνσεις EBV, είτε λανθάνουσες είτε ενεργές, συνδέονται σπάνια με την ασθένεια. Εντούτοις, EBV έχει εμπλεχτεί τουλάχιστον ως συμβάλλοντας παράγοντας στην αιτιολογία του nasopharyngeal καρκινώματος, του λεμφώματος Burkitt, και των λεμφωμάτων στους immunodeficient ασθενείς 4,8. Η δοκιμή Paul-Bunnell-Davidsohn για το heterophile αντίσωμα είναι ιδιαίτερα συγκεκριμένη για IM 10. Εντούτοις, 10-15% των ενηλίκων και τα υψηλότερα ποσοστά των παιδιών και των νηπίων με τις αρχικές μολύνσεις EBV δεν αναπτύσσουν τα heterophile αντισώματα 11. Υπάρχει μια ανάγκη για τις EBV-συγκεκριμένες ορολογικές δοκιμές να διαφοροποιηθούν οι αρχικές μολύνσεις EBV που είναι heterophile αρνητικές, από τις mononucleosis-όπως ασθένειες που προκαλούνται από άλλους πράκτορες όπως cytomegalovirus, το ιός των αδένων, και Toxoplasma το gondii 4. Οι τίτλοι αντισωμάτων στα συγκεκριμένα αντιγόνα EBV συσχετίζουν με τα διαφορετικά στάδια IM 4,10-12. Και τα αντισώματα IgM και IgG στο προερχόμενο από ιό αντιγόνο το (VCA) capsid οξύνουν τρεις έως τέσσερις εβδομάδες μετά από την αρχική μόλυνση EBV. Τα αντισώματα IgM αντι-VCA μειώνονται γρήγορα και είναι συνήθως μη ανιχνεύσιμα μετά από 12 εβδομάδες. Οι τίτλοι αντισωμάτων IgG αντι-VCA μειώνονται αργά μετά από να οξύνουν αλλά διαρκούν κατά τρόπο αόριστο. Τα αντισώματα στο πυρηνικό αντιγόνο EBV (EBNA) αναπτύσσονται από έναν μήνα σε έξι μήνες μετά από τη μόλυνση και, όπως τα αντισώματα αντι-VCA, εμμένουν κατά τρόπο αόριστο 11,12. Τα αντισώματα σε EBNA δείχνουν ότι η μόλυνση δεν ήταν πρόσφατη. 11 τα πρόωρα αντιγόνα το (EA) EBV αποτελούνται από δύο συστατικά διάχυτο (δ), και περιορισμένο (ρ). Οι όροι Δ και το Ρ απεικονίζουν τα διαφορετικά σχέδια του immunofluorescent λεκιάσματος που εκτίθενται από τα δύο συστατικά 13,14. Τα αντισώματα EA εμφανίζονται παροδικά μέχρι και τρεις μήνες κατά τη διάρκεια της οξείας φάσης του IM σε 85% των ασθενών 15,16. Η αντίδραση αντισωμάτων EA σε IM ασθενείς είναι συνήθως στο τμήμα Δ, ενώ σιωπηλό seroconversion σε EBV στα παιδιά παράγει τα αντισώματα στο τμήμα 5,11 Ρ. Μια οριστική διάγνωση της αρχικής μόλυνσης EBV μπορεί να γίνει με 95% των οξέων ορών φάσης βασισμένων στην ανίχνευση των αντισωμάτων σε VCA, EBNA, και EA. 12
Η γρήγορη κασέτα δοκιμής EBNA IgG (ολόκληρο αίμα/ορός/πλάσμα) είναι μια γρήγορη δοκιμή που χρησιμοποιεί έναν συνδυασμό του EBV που το πυρηνικό αντιγόνο έντυσε τα χρωματισμένα μόρια για την ανίχνευση του αντισώματος NA IgG στον ιό epstein-Barr ανθρώπινο ολόκληρο στο αίμα, τον ορό, ή το πλάσμα.

Πώς να χρησιμοποιήσει;

Επιτρέψτε στην κασέτα, το δείγμα, τον απομονωτή ή/και τους ελέγχους δοκιμής για να φθάσετε στη θερμοκρασία δωματίου (15-30°C) πριν από τη δοκιμή.
1. Φέρτε τη σακούλα στη θερμοκρασία δωματίου πρίν ανοίγει την. Αφαιρέστε την κασέτα δοκιμής από τη σφραγισμένη σακούλα και την χρησιμοποιήστε μέσα σε 1 ώρα.
2. Τοποθετήστε την κασέτα σε μια καθαρή και επιφάνεια επιπέδων.
Για να χρησιμοποιήσει dropper: Κρατήστε dropper κάθετα, σύρετε το δείγμα για 1cm επάνω από το ανώτερο όριο του ακροφυσίου όπως φαίνεται στην απεικόνιση φύσηξε, μεταφέρει 1 πτώση του ορού/πλάσματος (περίπου 10μl) ή 2 πτώσεων ολόκληρου του αίματος (περίπου 20μl) στο δείγμα καλά (σ) της κασέτας δοκιμής, κατόπιν προσθέτει 2 πτώσεις του απομονωτή (περίπου 80μl) και αρχίζει το χρονόμετρο.
Για να χρησιμοποιήσει micropipette: Το σιφώνιο και διανέμοντα 10μl του ορού/του πλάσματος ή 20μl ολόκληρου του αίματος στο δείγμα καλά (σ) της κασέτας δοκιμής, προσθέτουν έπειτα 2 πτώσεις του απομονωτή (περίπου 80μl) και αρχίζουν το χρονόμετρο.
3. Περιμένετε τη χρωματισμένη γραμμή να εμφανιστείτε. Διαβάστε το αποτέλεσμα σε 15 λεπτά. Μην ερμηνεύστε το αποτέλεσμα μετά από 20 λεπτά.
Σημείωση: Προτείνεται να μην χρησιμοποιηθεί ο απομονωτής πέρα από 6 μήνες μετά από να ανοίξει το φιαλίδιο.

ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ 
(Παρακαλώ αναφερθείτε στην απεικόνιση ανωτέρω)
ΘΕΤΙΚΟ: * Δύο ευδιάκριτες χρωματισμένες γραμμές εμφανίζονται. Μια χρωματισμένη γραμμή πρέπει να είναι στην περιοχή ελέγχου (γ) και μια άλλη χρωματισμένη γραμμή πρέπει να είναι στην περιοχή δοκιμής (τ).
*NOTE: Η ένταση του χρώματος στην περιοχή γραμμών δοκιμής (τ) θα ποικίλει ανάλογα με τη συγκέντρωση EBNA IgG παρούσα στο δείγμα. Επομένως, οποιαδήποτε σκιά του χρώματος στην περιοχή δοκιμής πρέπει να θεωρηθεί θετικός.
ΑΡΝΗΤΙΚΟΣ: Μια χρωματισμένη γραμμή εμφανίζεται στην περιοχή ελέγχου (γ). Καμία προφανής χρωματισμένη γραμμή δεν εμφανίζεται στην περιοχή δοκιμής (τ).
ΑΚΥΡΟΣ: Η γραμμή ελέγχου αποτυγχάνει να εμφανιστεί. Ο ανεπαρκής όγκος δειγμάτων ή οι ανακριβείς διαδικαστικές τεχνικές είναι οι πλέον πιθανοί λόγοι για την αποτυχία γραμμών ελέγχου. Αναθεωρήστε τη διαδικασία και επαναλάβετε τη δοκιμή με μια νέα κασέτα δοκιμής. Εάν το πρόβλημα εμμένει, διακόψτε την εξάρτηση δοκιμής αμέσως και ελάτε σε επαφή με τον τοπικό διανομέα σας.